Introduzione ai comuni terreni di coltura microbica (I)
Il terreno di coltura è una sorta di matrice nutritiva mista preparata artificialmente da varie sostanze in base alle esigenze della varia crescita microbica, che viene utilizzata per coltivare o separare vari microrganismi.Pertanto, la matrice nutritiva dovrebbe contenere nutrienti (compresa la fonte di carbonio, fonte di azoto, energia, sale inorganico, fattori di crescita) e acqua che possono essere utilizzati dai microrganismi.A seconda del tipo di microrganismi e dello scopo dell'esperimento, esistono diversi tipi e metodi di preparazione dei terreni di coltura.
Alcuni mezzi di coltura comuni nell'esperimento sono introdotti come segue:
Terreno agar nutrizionale:
Il terreno nutriente dell'agar viene utilizzato per la propagazione e la coltura dei batteri comuni, per la determinazione della conta batterica totale, la conservazione delle specie batteriche e la coltura pura.Gli ingredienti principali sono: estratto di manzo, estratto di lievito, peptone, cloruro di sodio, polvere di agar, acqua distillata.Il peptone e la polvere di manzo forniscono fonti di azoto, vitamine, amminoacidi e carbonio, il cloruro di sodio può mantenere una pressione osmotica equilibrata e l'agar è il coagulante del terreno di coltura.
L'agar nutrizionale è il tipo più elementare di terreno di coltura, che contiene la maggior parte dei nutrienti necessari per la crescita microbica.L'agar nutrizionale può essere utilizzato per la coltura batterica di routine.
Terreno agar sangue:
Il terreno di agar sangue è un tipo di terreno peptonico estratto di manzo contenente sangue animale defibrinato (generalmente sangue di coniglio o di pecora).Pertanto, oltre ai vari nutrienti necessari per la coltivazione dei batteri, può anche fornire coenzima (come il fattore V), eme (fattore X) e altri fattori di crescita speciali.Pertanto, il terreno di coltura del sangue viene spesso utilizzato per coltivare, isolare e preservare alcuni microrganismi patogeni che richiedono nutrimento.
Inoltre, l'agar sangue viene solitamente utilizzato per il test dell'emolisi.Durante il processo di crescita, alcuni batteri possono produrre emolisina per rompere e dissolvere i globuli rossi.Quando crescono sulla piastra del sangue, attorno alla colonia si possono osservare anelli emolitici trasparenti o traslucidi.La patogenicità di molti batteri è correlata alle caratteristiche emolitiche.Poiché l'emolisina prodotta da batteri diversi è diversa, anche la capacità emolitica è diversa e anche il fenomeno dell'emolisi sulla piastra del sangue è diverso.Pertanto, il test dell’emolisi viene spesso utilizzato per identificare i batteri.
Mezzo TCBS:
TCBS è un terreno agar con tiosolfato citrato sale biliare e saccarosio.Per l'isolamento selettivo del vibrio patogeno.Il peptone e l'estratto di lievito vengono utilizzati come nutrienti di base nel terreno di coltura per fornire fonte di azoto, fonte di carbonio, vitamine e altri fattori di crescita necessari per la crescita dei batteri;La maggiore concentrazione di cloruro di sodio può soddisfare le esigenze di crescita alofila del vibrio;Saccarosio come fonte di carbonio fermentabile;Il citrato di sodio, l'ambiente alcalino ad alto pH e il tiosolfato di sodio inibiscono la crescita dei batteri intestinali.La polvere di bile bovina e il tiosolfato di sodio inibiscono principalmente la crescita di batteri gram-positivi.Inoltre, il tiosolfato di sodio fornisce anche una fonte di zolfo.In presenza di citrato ferrico, l'idrogeno solforato può essere rilevato dai batteri.Se sono presenti batteri che producono idrogeno solforato, sulla piastra verrà generato un sedimento nero;Gli indicatori del terreno TCBS sono il blu di bromocresolo e il blu di timolo, che sono indicatori acido-base.Il blu di bromocresolo è un indicatore acido-base con un intervallo di variazione del pH compreso tra 3,8 (giallo) e 5,4 (blu-verde).Esistono due intervalli di scolorimento: (1) l'intervallo acido è pH 1,2~2,8, che cambia dal giallo al rosso;(2) L'intervallo degli alcali è pH 8,0~9,6, cambiando dal giallo al blu.
Terreno agar peptone soia formaggio TSA:
La composizione del TSA è simile a quella dell'agar nutriente.Nello standard nazionale viene solitamente utilizzato per testare i batteri che si depositano nelle camere bianche (aree) dell'industria farmaceutica.Selezionare il punto di prova nell'area da testare, aprire la piastra TSA e posizionarla sul punto di prova.I campioni devono essere prelevati quando esposti all'aria per più di 30 minuti per tempi diversi e quindi coltivati per il conteggio delle colonie.Diversi livelli di pulizia richiedono conteggi di colonie diversi.
Agar Mueller Hinton:
Il terreno MH è un terreno microbico utilizzato per rilevare la resistenza dei microrganismi agli antibiotici.È un terreno non selettivo su cui può crescere la maggior parte dei microrganismi.Inoltre, l'amido presente negli ingredienti può assorbire le tossine rilasciate dai batteri, quindi non influirà sui risultati dell'operazione antibiotica.La composizione del mezzo MH è relativamente libera, il che favorisce la diffusione degli antibiotici, in modo che possa mostrare un'evidente zona di inibizione della crescita.Nel settore sanitario cinese, il terreno MH viene utilizzato anche per i test di sensibilità ai farmaci.Quando si esegue un test di sensibilità ai farmaci per alcuni batteri speciali, come lo Streptococcus pneumoniae, è possibile aggiungere al terreno il 5% di sangue di pecora e NAD per soddisfare le diverse esigenze nutrizionali.
Agar SS:
L'agar SS viene solitamente utilizzato per l'isolamento selettivo e la coltura di Salmonella e Shigella.Inibisce i batteri gram-positivi, la maggior parte dei coliformi e dei protei, ma non influisce sulla crescita della salmonella;Il tiosolfato di sodio e il citrato ferrico vengono utilizzati per rilevare la generazione di idrogeno solforato, rendendo nero il centro della colonia;Il rosso neutro è l'indicatore del pH.La colonia dello zucchero in fermentazione che produce acido è rossa, mentre la colonia dello zucchero non fermentante è incolore.La Salmonella è una colonia incolore e trasparente con o senza centro nero, mentre la Shigella è una colonia incolore e trasparente.
Orario di pubblicazione: 04 gennaio 2023