Una provetta da centrifuga è una provetta semplice in grado di sopportare velocità di rotazione e pressioni elevate, come la separazione di alcuni campioni e la separazione dei sedimenti surnatanti.Il tubo per centrifuga di ultrafiltrazione ha due parti simili al tubo interno e al tubo esterno.La camera d'aria è una membrana con un certo peso molecolare.Durante la centrifugazione ad alta velocità, quelli con un peso molecolare inferiore coleranno nel tubo inferiore (ovvero il tubo esterno), mentre quelli con un peso molecolare maggiore rimarranno intrappolati nel tubo superiore (ovvero il tubo interno).Questo è il principio dell'ultrafiltrazione e viene spesso utilizzato per concentrare i campioni.
Le provette per centrifuga per ultrafiltrazione solitamente possono essere utilizzate senza pretrattamento, ma per il trattamento dei campioni proteici, in particolare per soluzioni proteiche diluite (< 10ug/ml), il tasso di recupero della concentrazione con le membrane di ultrafiltrazione spesso non è quantitativo.Sebbene i materiali PES riducano al minimo l’adsorbimento non specifico, alcune proteine, soprattutto quando sono diluite, potrebbero presentare problemi.Il grado di legame non specifico varia con la struttura delle singole proteine.Le proteine contenenti domini carichi o idrofobici hanno maggiori probabilità di legarsi in modo irreversibile a superfici diverse.Il pretrattamento di passivazione sulla superficie della provetta da centrifuga di ultrafiltrazione può ridurre la perdita di adsorbimento proteico sulla superficie della membrana.Nella maggior parte dei casi, il pretrattamento della colonna prima di concentrare la soluzione proteica diluita può migliorare la velocità di recupero, poiché la soluzione può riempire i siti di adsorbimento delle proteine vuote esposti sulla membrana e sulla superficie.Il metodo di passivazione consiste nel pre-immergere la colonna con un volume maggiore di soluzione di passivazione per più di 1 ora, lavare accuratamente la colonna con acqua distillata, quindi centrifugarla una volta con acqua distillata per rimuovere completamente la soluzione di passivazione che potrebbe rimanere sulla pellicola .Fare attenzione a non lasciare asciugare il film dopo la passivazione.Se si desidera utilizzarlo successivamente è necessario aggiungere acqua distillata sterile per mantenere umida la pellicola.
I tubi per centrifuga di ultrafiltrazione solitamente non possono essere sterilizzati e riutilizzati.Poiché il prezzo di un singolo tubo non è economico, molte persone provano a riutilizzarlo: l’esperienza consiste nel pulire la superficie della membrana con acqua distillata per molte volte e centrifugarla una o due volte.La provetta che può essere centrifugata al contrario può essere immersa in acqua distillata e poi centrifugata al contrario per più volte, il che sarà meglio.Può essere utilizzato ripetutamente per lo stesso campione e può essere immerso in acqua distillata quando non viene utilizzato, ma deve essere prevenuta la contaminazione batterica.Non mescolare campioni diversi.Alcune persone dicono che l'immersione in alcol al 20% e NaOH 1n (idrossido di sodio) può prevenire la crescita di batteri e prevenire l'essiccazione.Finché la membrana di ultrafiltrazione invade l'acqua, non può essere lasciata asciugare.Tuttavia, altri sostengono che distruggerà la struttura della membrana.In ogni caso, i produttori generalmente non supportano il riutilizzo.L'uso ripetuto bloccherà la dimensione dei pori della membrana del filtro e causerà anche perdite di liquido, che influenzeranno i risultati sperimentali.
Orario di pubblicazione: 05-settembre-2022