Requisiti di raccolta, conservazione e trasporto dei campioni per esperimenti comuni

Requisiti di raccolta, conservazione e trasporto dei campioni per esperimenti comuni

1. Raccolta e conservazione di campioni patologici:

☛Sezione congelata: rimuovere i blocchi di tessuto appropriati e conservarli in azoto liquido;

☛Sezionamento in paraffina: rimuovere i blocchi di tessuto appropriati e conservarli in paraformaldeide al 4%;

☛Dialini cellulari: i vetrini cellulari sono stati fissati in paraformaldeide al 4% per 30 minuti, quindi sostituiti con PBS e immersi in PBS e conservati a 4°C.

2. Raccolta e conservazione di campioni di biologia molecolare:

☛Tessuto fresco: tagliare il campione e conservarlo in azoto liquido o in frigorifero a -80°C;

☛Campioni di paraffina: conservare a temperatura ambiente;

☛Campione di sangue intero: prelevare una quantità adeguata di sangue intero e aggiungere una provetta per la raccolta del sangue con EDTA o anticoagulante con eparina;

☛Campioni di fluidi corporei: centrifugazione ad alta velocità per raccogliere il sedimento;

☛Campioni cellulari: le cellule vengono lisate con TRizol e conservate in azoto liquido o in frigorifero a -80°C.

3. Raccolta e conservazione di campioni sperimentali di proteine:

☛Tessuto fresco: tagliare il campione e conservarlo in azoto liquido o in frigorifero a -80°C;

☛Campione di sangue intero: prelevare una quantità adeguata di sangue intero e aggiungere una provetta per la raccolta del sangue con EDTA o anticoagulante con eparina;

☛Campioni cellulari: le cellule vengono completamente lisate con una soluzione di lisi cellulare e quindi conservate in azoto liquido o in frigorifero a -80°C.

4. Raccolta e conservazione di campioni ELISA, radioimmunologici e per esperimenti biochimici:

☛Campione di siero (plasma): prelevare il sangue intero e aggiungerlo a una provetta da procoagulazione (provetta anticoagulante), centrifugare a 2500 giri/min per circa 20 minuti, raccogliere il surnatante e conservarlo in azoto liquido o in frigorifero a -80°C;

☛Campione di urina: centrifugare il campione a 2500 giri/min per circa 20 minuti e conservarlo in azoto liquido o in frigorifero a -80°C;fare riferimento a questo metodo per il liquido toracico e ascite, il liquido cerebrospinale e il liquido di lavaggio alveolare;

☛Campioni cellulari: quando si rilevano i componenti secreti, centrifugare i campioni a 2500 giri/min per circa 20 minuti e conservarli in azoto liquido o in frigorifero a -80°C;quando si rilevano componenti intracellulari, diluire la sospensione cellulare con PBS e congelare e scongelare ripetutamente per distruggere le cellule e rilasciare componenti intracellulari.Centrifugare a 2500 giri per circa 20 minuti e raccogliere il surnatante come sopra;

☛Campioni di tessuto: dopo aver tagliato i campioni, pesarli e congelarli in azoto liquido o in frigorifero a -80°C per un uso successivo.

5. Raccolta di campioni metabolomici:

☛Campione di urina: Centrifugare il campione a 2500 giri/min per circa 20 minuti e conservarlo in azoto liquido o in frigorifero a -80°C;fare riferimento a questo metodo per il liquido toracico e ascite, il liquido cerebrospinale, il liquido di lavaggio alveolare, ecc.;

☛Dopo aver tagliato il campione di tessuto, pesarlo e congelarlo in azoto liquido o in frigorifero a -80°C per un uso successivo;