Reazione a catena della polimerasi, abbreviata comePCRin inglese, è una tecnica di biologia molecolare utilizzata per amplificare specifici frammenti di DNA.Può essere considerato come una speciale replicazione del DNA all'esterno del corpo, che può aumentare notevolmente una quantità molto piccola di DNA.Durante l'interoPCRNel processo di reazione, una classe di sostanze svolge un ruolo fondamentale: gli enzimi.
1. DNA Taq
Negli esperimenti nei primi giorni diPCR, gli scienziati hanno utilizzato la DNA polimerasi I dell'Escherichia coli, ma c'è un problema con questo enzima: deve ricostituire il nuovo enzima ogni volta che viene eseguito un ciclo, il che rende le fasi operative leggermente complicate ed è difficile da amplificare in modo completamente automatico.Questo problema è stato risolto dopo che gli scienziati hanno isolato accidentalmente la Taq DNA polimerasi dal Thermus acquatico nel 1988. Da allora, l'amplificazione automatica del DNA è diventata una realtà.Anche la scoperta di questo enzima faPCRtecnologia una tecnologia conveniente, pratica e universale.Attualmente, la Taq DNA polimerasi è la polimerasi più comune nei kit DNA.
2. PfuDNA
Come accennato in precedenza, la Taq DNasi ha un grosso bug, quindi gli scienziati hanno modificato la Taq DNA polimerasi in una certa misura per evitare un'amplificazione non specifica dovuta a disallineamenti, con conseguenti risultati dei test imprecisi.Ma la modifica della Taq DNA polimerasi può inibire l'attività della DNA polimerasi a temperatura ambiente.La PfuDNA polimerasi può compensare gli svantaggi sopra menzionati della Taq DNA polimerasi, in modo che la reazione PCR possa essere eseguita normalmente e il tasso di successo dell'amplificazione del gene bersaglio possa essere effettivamente migliorato.
3. Trascrittasi inversa
La trascrittasi inversa è stata scoperta nel 1970. Questo enzima utilizza l'RNA come modello, il dNTP come substrato, segue il principio dell'accoppiamento delle basi e sintetizza un singolo filamento di DNA complementare al modello di RNA nella direzione 5′-3′.La trascrittasi inversa dipende principalmente dall'attività della DNA polimerasi da modelli di DNA o RNA e pertanto non ha attività di esonucleasi 3′-5′.Tuttavia, ha attività di RNasi H, che limita in una certa misura la durata della sintesi della trascrittasi inversa.A causa della bassa fedeltà e termostabilità della trascrittasi inversa selvatica, gli scienziati l'hanno modificata.
PerPCResperimenti, i principali materiali di consumo sono: provetta PCR individuale, provetta PCR da 4/8 strisce, piastre PCR.
Quella di LabioMateriali di consumo per PCRavere quanto seguevantaggi:
Piastre PCR: Ampia compatibilità con termociclatori;Identificazione dei pozzetti facile e ad alto contrasto;buona riflessione della fluorescenza;buonotrasferimento di calore;Inibitori certificati di DNasi, RNasi, DNA e PCR e testati apirogeni.
Provette PCR individuali: Resistente all'evaporazione;buonotrasferimento di calore;eccellente chiarezza ottica; inibitori certificati di DNasi, RNasi, DNA, PCR e testati apirogeni.
Provette per PCR da 4/8 strip: Pareti ultrasottili; elevata chiarezza; buona riflessione della fluorescenza;può essere utilizzato nell'industria farmaceutica, nell'industria alimentare e nella biologia molecolare; materiale PP vergine di alta qualità; DNasi, RNasi, DNA, inibitori della PCR certificati e testati apirogeni.
Orario di pubblicazione: 09-giugno-2023